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ECL发光液为您助力蛋白质检测

发布时间:2019-09-05 阅读:85

    一般使用的发光液A和B分别是鲁米诺和过氧化氢,在辣根过氧化物酶(HRP)的催化作用下,鲁米诺与过氧化氢反应生成一种过氧化物,过氧化物不稳定随即分解,形成一种能发光的电子激发中间体,当后者由激发态返回至基态,就会产生荧光。在发光过程中不需要消耗HRP,HRP只是起催化作用,所以只要HRP没降解失活,是可以重复加发光液的。但HRP作为一种蛋白酶,在室温放置时间过长,是会降解的;同时在发光过程中有什么物质(比如显影液)污染了膜的话,也有可能灭活膜上的HRP。
    GE ECL发光液,它采用鲁米诺(luminol)底物进行灵敏的检测,并且加入了增强剂,增加了酶活力,从而大幅提高了信号强度和持续时间,适用于现在所有常规的蛋白质印迹实验。
    鲁米诺试剂通常稳定存在且不会发射光信号,一旦和特定性的酶进行相互作用之后,能够转换成一种发光产物。在绝大多数当代的ECL系统中,偶联于二抗上的辣根过氧化物酶(HRP)被用来催化鲁米诺发生氧化,从而产生425 nm波长的化学发光。
    目前,GE ECL全系列包括5种产品:ECL Start,ECL,ECL Prime,ECL Select 和ECL Plex,和传统方法以及其他类似产品相比:
    灵敏度更高,可达低pg量级,获得更可靠优秀的结果。
    信号稳定性更高,在数小时内维持足够强度,可以完成反复曝光,非常适合大量实验的开展,可以从容地安排实验和检测之间的时间。
    信号强度更强,意味着更低的一抗和二抗用量,即降低了背景,又节约了抗体试剂的费用。
    线性动态范围更宽,不同丰度的各种蛋白能在单次曝光后被检测出来并精确定量。
    GE Healthcare 是世界上di一个化学发光试剂Amersham ECL的发明者,直至今日仍被广泛地应用,并获得了用户的广泛信赖。秉承不断创新的精神,GE Healthcare一直以来为科研工作者提供高灵敏度、高性能的分子印迹系列产品。GE ECL(Enhanced Chemiluminescence,增强型化学发光)诞生于1990年,是业界zui早的化学发光试剂品牌(即原Amersham ECL)。在此后的20多年中,其产品库不断丰富,以适应从常规蛋白检测到采用基于荧光Amersham ECL plex进行多道分析的各种应用。通过选择ECL检测系统,研究人员不仅可以避开对人有危害的放射性同位素操作,同时还拥有了可随意支配,方便使用的分析工具,这些特点是蛋白分析比以前更加快速方便,也更加灵活。

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